高效液相色譜分析是一種高效，快速，準(zhǔn)確的分離分析方法，廣泛應(yīng)用于石油化工、生命科學(xué)、環(huán)境、醫(yī)藥及食品安全行業(yè)。本文給大家介紹高效液相色譜分析方法開發(fā)的一般流程。

高效液相色譜分析方法開發(fā)的步驟應(yīng)考慮如下內(nèi)容：

a)      信息調(diào)研：通過文獻(xiàn)或其他來源，收集原料藥的相關(guān)信息

b)     溶解度研究：確定溶解度情況和最大吸收波長

c)      色譜條件選擇：根據(jù)溶解度研究結(jié)果、化合物的保留時間等信息確定色譜柱、流動性、進(jìn)樣樣品

d)     進(jìn)行初步的HPLC分析檢測，最初階段的HPLC測試傾向采用的參數(shù)見表1。

e)      確定梯度或等度模式

f)      優(yōu)化色譜條件提高分離度：通過改變流動性組成、緩沖鹽、pH、色譜柱、流速、溫度等實現(xiàn)合適的分離度

g)     進(jìn)行原料藥的強降解試驗確定方法的適用性

h)     確定系統(tǒng)適用性參數(shù)

i)       方法總結(jié)并完成開發(fā)報告

j)       進(jìn)行方法驗證