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HPLC液相色譜儀常見故障診斷與日常維護策略

更新時間:2026-05-18  點擊次數(shù):194
  HPLC液相色譜儀的常見故障診斷與日常維護策略如下:
 
  常見故障診斷
 
  壓力異常
 
  壓力過高:可能原因是系統(tǒng)堵塞(如進樣針、在線過濾器、色譜柱篩板或管路堵塞)、流動相黏度過大、保護柱污染。解決方法是逐段排查確定堵塞點,更換或清洗在線過濾器,反沖或更換色譜柱篩板,用適當比例有機相稀釋流動相。
 
  壓力過低或無壓力:可能是泵密封圈磨損導致漏液、單向閥失效、溶劑瓶或管路漏氣、流動相不足??筛鼡Q泵密封圈,超聲清洗或更換單向閥,檢查并擰緊所有接頭,補充流動相并排空氣泡。
 
  壓力波動:可能是泵內(nèi)有氣泡、單向閥污染或磨損、溶劑混合比例不當導致氣泡析出。可用高流速排空脫氣,清洗或更換單向閥,確保流動相充分脫氣。
 
  基線問題
 
  基線噪聲大或漂移:可能是檢測器流通池污染或有氣泡、色譜柱未平衡、流動相污染或脫氣、溫度波動大、氘燈能量不足。可沖洗流通池,延長平衡時間,更換新鮮流動相并脫氣,控制柱溫箱溫度,更換檢測器光源。
 
  峰形異常
 
  拖尾峰:常見于硅膠柱殘留硅羥基作用,或色譜柱污染、保護柱失效。可更換保護柱,或向流動相中加入掃尾劑。
 
  前沿峰:通常由色譜柱過載(進樣量或樣品濃度過大)導致。應稀釋樣品或減少進樣體積。
 
  分裂峰:多為保護柱或色譜柱入口篩板堵塞,或進樣器轉(zhuǎn)子磨損。需清洗或更換篩板,或維修進樣閥。
 
  保留時間不穩(wěn)定:可能是流動相組成變化(揮發(fā)或混合不準確)、柱溫變化、泵流速不穩(wěn)定、色譜柱老化。可使用帶蓋溶劑瓶,確保柱溫箱控溫準確,檢查泵流速,必要時更換色譜柱。
 
  漏液:常見漏液部位有泵頭密封圈、進樣閥轉(zhuǎn)子密封墊、管路接頭、檢測器流通池??蓴Q緊接頭,更換老化或磨損的密封圈/密封墊。
 
  日常維護策略
 
  流動相管理
 
  使用HPLC級溶劑或超純水(電阻率≥18.2 MΩ·cm),經(jīng)0.45μm濾膜過濾并超聲脫氣15分鐘,防止氣泡或顆粒堵塞系統(tǒng)。
 
  水相流動相建議現(xiàn)配現(xiàn)用,存放不超過2天,防止微生物滋生。
 
  含緩沖鹽的流動相需特別注意pH范圍(通常2 - 8),超出范圍會損傷硅膠基質(zhì)色譜柱,且使用后需用5 - 10倍柱體積的水沖洗,再用有機相沖洗保存。
  
  泵系統(tǒng)維護
 
  運行后及時清洗泵頭,禁用腐蝕性溶劑,避免干吸。
 
  定期更換泵密封圈(根據(jù)使用頻率,通常每3 - 6個月),檢查單向閥,若壓力波動大,可拆下超聲清洗或更換。
 
  進樣系統(tǒng)清潔
 
  自動進樣器每次測試后用甲醇 - 水(50:50)沖洗進樣針,并用擦鏡紙擦拭針外殘留;每周拆卸進樣閥,浸泡于10%硝酸溶液中超聲清洗。
 
  手動進樣確保樣品注入,避免殘留污染定量環(huán),高粘度樣品需稀釋后進樣。
 
  色譜柱保護
 
  嚴禁直接進樣未過濾的樣品,建議預裝0.22μm在線過濾器;避免超壓運行(通常不超過柱標稱壓力的80%)。
 
  反相柱(C18)需保存于甲醇 - 水(1:1)中,正相柱(硅膠柱)用正己烷封存,生化柱(如蛋白質(zhì)柱)需添加防腐劑。
 
  每日分析結(jié)束后,用初始流動相(如甲醇 - 水)沖洗色譜柱30分鐘,去除殘留樣品;長期保存時,用純有機溶劑(如甲醇)沖洗并封存。
 
  檢測器維護
 
  紫外檢測器定期用乙醇擦拭流通池窗口,氘燈壽命約2000小時,能量衰減至初始值70%時需更換。
 
  熒光檢測器每次測試后用清水沖洗流通池,避免熒光物質(zhì)殘留干擾后續(xù)檢測。
 
  定期深度維護
 
  季度維護時,使用5%硝酸溶液沖洗金屬管路,去除氧化沉積物;反相系統(tǒng)可用0.1%磷酸清洗;校準流速精度,通過秒表測量實際流量與設定值偏差。
 
  每周檢查泵頭是否有漏液跡象,查看在線過濾器的顏色變化,若已變深,應取出清洗或更換篩板。
 
  每月維護時,根據(jù)使用頻率和緩沖鹽的強度,定期(如每3 - 6個月)計劃更換泵密封墊;記錄氘燈的使用時間,接近額定壽命時(通常1000 - 2000小時)留意基線變化,提前準備備件。
 
  環(huán)境與操作規(guī)范
 
  實驗室溫度需控制在20 - 25℃,濕度<60%,避免冷凝水腐蝕光學部件。
 
  開機順序:先打開在線脫氣機、檢測器,再啟動泵,后打開工作站軟件;關(guān)機順序:先停止采集數(shù)據(jù),然后按結(jié)束沖洗流程沖洗系統(tǒng),再關(guān)泵、關(guān)檢測器,后關(guān)閉軟件和電源。
 
  處理有毒溶劑時,務必在通風櫥內(nèi)操作,并佩戴好手套和護目鏡;實驗產(chǎn)生的廢液應分類收集,交由有資質(zhì)的機構(gòu)處理。
 
  準備儀器使用維護記錄本,詳細記錄每次的開機狀態(tài)、使用樣品、出現(xiàn)的異常、更換的備件等,便于日后排查故障。
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